Metodo pri determinado de glukoza oksidazo

La principo de la metodo. La metodo baziĝas sur la specifeco de la agado de la glukoza oksasa enzimo. Ĉi tiu enzimo oxidigas glukozon en ĉeesto de molekula oksigeno por formi gluconolaktonon, kiu spontane hidrolizas al glukona acido. Glukoza oksidazo oxidigas glukozon por formi hidrogenan peroksidon (H)₂Ho₂), kiu reagas kun 4-aminoantipirino kaj fenolo sub la agado de peroksidazo. Rezulte, rozkolora komponaĵo formiĝas kies optika denseco je 510 nm estas proporcia al la koncentriĝo de glukozo en la provaĵo.

glukozo + O₂ + H₂Ho → glukona acido + H₂Ho₂

2 N₂Ho₂ + 4-aminoantipirino + fenolo → quinonimineco + 4H₂Ho

Teamoj CPK, centrifugilo, termostato, rakedoj, provtuboj, pipetoj, biologia materialo, reagentoj enhavitaj en la funkcianta solvo.

eksperimenta specimeno, ml

norma specimeno, ml

malaktiva testo (N₂O), ml

Solva kalibra glukozo (referenco)

Tuboj estas inkubataj en termostato je 37 ° C dum 15 minutoj, poste kolorigitaj sur CPC kun verda filtrilo en kuketoj kun tavolo dikeco de 5 mm kontraŭ malplena specimeno (N₂O). La rozkolora koloro estas stabila dum 1 horo post kovado.

Kalkulo enhavo en glukozo estas produktita per la formulo:

C =x C normo kie

C estas la glukoza enhavo en la eksperimenta specimeno, mol / l,

Eop - optika denseco de la specimeno,

Manĝas - optika denseco de la kalibra specimeno,

C-normo - la enhavo en la kalibra solvo, mol / l.

Normalaj valoroj:  novnaskitoj - 2,8-4,4 mmol / l

 infanoj - 3,9 -5,8 mmol / l

 plenkreskuloj - 3,9 - 6,2 mmol / l

Hipoglucemio (GHC).La kresko de sanga glukozo estas pro multaj kialoj, laŭ kiuj oni distingas du grupojn de hiperglicemio.

1. Izola - asociita kun nesufiĉa insulino en la korpo aŭ pro la neefikeco de ĝia ago.

2. Ekstrainsula (eksterinsula) - ne dependas de la influo de insulino.

La jenaj procezoj estas plej signifaj en la formado de HHCoj: pliigita falo de glicogeno, pliigo de neoglucogeno, inhibicio de glukogeno, malpliigo de uzado de glukoza histo sub influo de hormonaj insulinaj antagonistoj: somatotropino, glukortikoidoj, tiroksino, tirotropino.

Manĝaĵa hiperglicemio notiĝas kun troa konsumado de glukozo en la sango (ekzemple hiperglicemio kun sukero). "Hepata" hiperglicemio okazas en difuzaj hepataj lezoj.

Persista kaj severa hiperglicemio plej ofte akompanas diabeton. Kutime izoli insulin-dependan diabeton mellitus kaj neinsulan-dependan diabeton mellitus, aŭ, respektive, diabeton mellitus de tipo I kaj diabeton mellitus de tipo II. La formado de tipo I-diabeto estas asociita ĉefe kun difektita sintezo kaj metabolo de insulino.

La dua grupo de hiperglicemio estas asociita ĉefe kun hiperfunkcio de la endokrinaj glandoj produktantaj hormonojn - insulinajn antagonistojn. Ĝi estas observata en malsanoj kiel la sindromo kaj malsano de Itsenko-Cushing, akromegalio, tirotoksikozo, fokromocitomo, glucoganomo. La niveloj de glukozo en la sango kreskas kun iuj hepataj malsanoj (precipe en 10-30% de pacientoj kun hepato-cirozo), hemokromatosis (pigmentita hepato-cirozo, bronza diabeto).

Hipoglucemio (GPG) - malpliigo de sango-glukozo - plej ofte asociita kun absoluta aŭ relativa kresko de insuliniveloj en la sango. Ekstrapancreata hipoglikemio estas konstatita rezulte de malekvilibro inter la severeco de la procezoj de glicogenolizo kaj gliconeogenezo en la hepato en akra kaj kronika hepatito, cirozo, akra kaj subakva hepato-distrofio, alkoholismo, venenado kun arseniko, fosforo, kun longedaŭra obstrukcia hepato, primara hepato . Malkresko de sanga glukoza koncentriĝo ofte estas observata ĉe pacientoj kun kancero de la ezofago kaj aliaj malignaj tumoroj de ekster-pankreata lokalizo (fibroma, fibrosarcoma, neŭroma), kaj ankaŭ kun indomaj vomoj, anoreksio, hepata diabeto, uremio, profunda laktado kaj glukozio en gravedaj virinoj.

Hipoglucemio povas esti de centra origino pro mensa traŭmato, encefalito, subaraknoida hemorragio, cerba tumoro.

1. Heredaĵoj de la digesto de karbonhidratoj.

2. Kiujn tipojn de hiperglucosemio vi konas?

3. Kiuj estas la kaŭzoj de patologia hiperglucoseemio?

4. Kio estas la kaŭzo de insulino-dependa diabeto mellitus?

5. Kio estas la biokemiaj kaŭzoj de heredaj malsanoj: a) glukogenozo? b) aglogenozo? c) fruktosemio? d) galactosemia?

6. Kio estas la biokemiaj ŝanĝoj en karbonhidrata metabolo dum fastado?

7. La principo de la metodo por determini glukozon-toleremon.

Kiam preskribas la glukozan oksidazan metodon?

Ĉi tiu provo estas uzata por detekti malsanan toleron de sukero kaj disvolviĝo de prediabetoj, same kiel ĉe la alteco de la malsano. Sed por tiaj celoj, analizo malofte uzas, tio estas pro sia alta kosto kaj longa atendo de rezulto. Plej ofte, la determino de glukozo en sango kaj urino per ĉi tiu metodo estas uzata en la diferenca diagnozo de malsanoj kiel:

Sukero reduktiĝas senprokraste! Diabeto kun la paso de la tempo povas konduki al tuta aro da malsanoj, kiel vidproblemoj, haŭtaj kaj haraj kondiĉoj, ulceroj, gangreno kaj eĉ kanceriga tumoro! Homoj instruis maldolĉan sperton normaligi siajn nivelojn de sukero. legi plu.

• sindromo de intoleranco al laktozo,
• maltoleremo al fruktozo,
• sekrecio de fruktozo kun korpaj fluidoj,
• pliigita koncentriĝo de pentose en la urino.

La nedubebla avantaĝo de la glukoza oksidasa testo estas ĝia precizeco.

Kio estas la bazo de ĉi tiu metodo?

Ekzistas diversaj metodoj por determini la koncentriĝon de glukozo en la sango, sed glukoza oksasezo estas la plej ĝusta. Ĝi baziĝas sur tio, ke dum la interagado de sukero kun atmosfera oksigeno, la reagento estas oksidita. La hidrogena peroksido estas liberigita en la solvon. Ĉi tiu substanco interagas kun ortotoluidino por formi koloran komponaĵon. Por la konduto de ĉi tiu reago, necesas la ĉeesto de specialaj enzimoj. Dum la oksida reago, glukoza oksidozo devas ĉeesti, kaj dum makulado de la likvaĵo devas perdiksido. La kolora intenseco de la solvo dependos de la glukoza enhavo kaj plej intensos ĉe ĝia alta enhavo.

La esenco de determino de glukozo-oksidazo

Taksado de la rezulto okazas per la kvanta metodo de fotometrio post la sama tempodaŭro. Estas devige uzi kalibran solvon, kiu enhavas certan deklaritan sukeron normon kaj, komencante de ĝi, vi povas juĝi la koncentriĝon de glukozo en la korpaj fluidoj, ofte en la sango.

Kiel efektivigas la analizon?

Materialo estas prenita de la paciento sur malplena stomako. Por la testo oni uzas venan sangon en kvanto de 5 ml. En la vespero de diagnozo, al la paciento oni montras striktan dieton. Ĉi tio ebligos juĝi la fidindecon de la rezulto kaj ekskludi eblajn analizajn erarojn. 2 tagojn antaŭ la sango, la paciento devas forlasi la malbonajn kutimojn trinki alkoholon kaj fumadon. Ankaŭ necesas limigi la konsumadon de tro dolĉaj manĝaĵoj kaj eviti streĉajn situaciojn kiam ajn eblas.

Por akiri plasmon kun sukero, sango centrifugas.

Plej ofte ĉi tiu metodo por determini koncentriĝon de glukozo estas farita per centrifugado, kiuj estas elementaj elementoj izolitaj. La kvanto da sukero estas jam determinita en plasmo. Kiam oni aldonas al ĝi ĉiujn necesajn reaktivojn, la koloro estas observata post 20 minutoj se la provo efektiviĝas ĉe ĉambra temperaturo. Kalkulo de glukozo estas farata laŭ la kalibra horaro aŭ uzante la regulon de porcioj.

Esploroj de Reagantoj

Por determini sukeron, estas plej oportune uzi esprimajn metodojn por determini glukozon en sango. Ĉi tio estas pro facileco de uzo kaj rapidaj rezultoj. Krome la paciento ne bezonas iri al laboratorio aŭ hospitalo. Sed male al la glukoza oksidasa testo, tia diagnozo estas nefidinda. Ĉar ĝi ne diferencas glukozon disde aliaj sukeroj kaj kune determinas ilian koncentriĝon.

La bazo de la glukoza oksasa reago estas natria klorido 9% solvo kaj zinka sulfato 50%. Ili estas aldonitaj ĉe la stadio de centrifugado de sango. Krome estas uzata bufrata solvo kun aceta acido kaj natria acetato. Metoda titolado determinas sian pH je 4,8. Post tio aldoniĝas glukoza oksidozo, pro kio oni liberigas hidrogenan peroksidon kaj peroksidazon, kiu partoprenas en makulado de la solvo al la dezirata koncentriĝo por akiri ĝustan rezulton.

Normoj en la analizo

La mezurado de sukero okazas en specialaj ekzempleroj - milimetroj po litro de solvo.

Sango-glukoza oksidase estas deviga sur malplena stomako kaj uzu plasmon aŭ serumon por ĉi tio. La normo de ĝia kvanto por plenkreskuloj por virinoj kaj viroj estas 3,3-5,5. Por infanoj malpli ol 15-jaraj, ĉi tiu cifero estas iomete pli malalta kaj ĉirkaŭ 3,2-5,3. En novnaskitoj, sanga glukozo estas 1,7-4,2. Pliiĝo de indikiloj estas observata kun la evoluo de paciento kun diabeto mellitus aŭ kun difektita glukoza toleremo. Ĉi tiu kondiĉo estas prediabetes, kaj se ĝi restos traktata ĝustatempe, ĝi baldaŭ kondukos al la disvolviĝo de ĉi tiu severa patologio.

Ĉu ankoraŭ ŝajnas neeble kuraci diabeton?

Juĝante per la fakto, ke vi legas ĉi tiujn liniojn, venko en la batalo kontraŭ alta sanga sukero ankoraŭ ne estas de via flanko.

Kaj ĉu vi jam pensis pri hospital-kuracado? Komprenebla, ĉar diabeto estas tre danĝera malsano, kiu, se ĝi ne traktas, povas rezultigi morton. Konstanta soifo, rapida urinado, neklara vidado. Ĉiuj ĉi tiuj simptomoj estas konataj de vi unuavice.

Sed ĉu eblas trakti la kaŭzon pli ol la efikon? Ni rekomendas legi artikolon pri aktualaj diabetaj traktadoj. Legu la artikolon >>